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浓缩胶的作用原理 浓缩胶导致蛋白质样本浓缩聚集的原理

浏览 497次发布时间:2024-04-20 

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浓缩胶导致蛋白质样本浓缩聚集的原理

浓缩胶导致蛋白质样本浓缩聚集的原理:浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。

当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。

配制方法

一般同工酶可选择7?5%~10%的胶(过氧化物酶和酯酶7?5%较合适,超氧化物歧化酶用10%,可溶性蛋白可根据需要配制)。将配制好的凝胶液置真空干燥器中,抽气10Min,再加入TEMED15μl;混匀后用一细玻棒引流,沿无凹槽的玻板缓缓注入胶室中,注胶过程要防止气泡产生。

为什么浓缩胶具有浓缩作用啊?实验的思考题~~~求大神解答!!!

浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。
参考答案:http://baike.baidu.com/view/3335221.htm

为什么浓缩胶具有浓缩作用啊?实验的思考题~~~求大神解答!!!

浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。
参考答案:http://baike.baidu.com/view/3335221.htm

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中浓缩胶的作用是什么?

在上样孔里加样的时候样品是有一定的高度的,样品里的蛋白没有站在一条起跑线上。浓缩胶的作用就是压缩样品中的蛋白质成为一条细线站在同一条起跑线上,这样影响蛋白迁移速率的因素就只有分子量的大小了,也就更有可比性了。

浓缩胶的作用原理?

浓缩胶是在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中,同一介质的凝胶浓度分为 两种,负极的加样侧一般浓度为2%〜5%, 称为浓缩胶,其余部分浓度为6%〜8%, 称为分离胶。

由于浓缩胶浓度低、孔径大, 而分离胶浓度高、孔径小。

带电荷的蛋白质 或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小,移动速度快,当接近小孔径的分离胶时,遇到的阻力大,移动速度减慢而使样品浓缩,形 成一条狭窄区带,以减少电泳过程中的谱 带扩散。

浓缩胶与分离胶的pH值不同也呵 以强化样品的浓缩作用。

浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。

当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。

电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。

蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。

电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。

大大提高了电泳的灵敏度。

浓缩胶的作用原理?

浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。

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