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PEG8000浓缩病毒注意事项 PEG促进细胞融合的注意事项有那些?

浏览 1248次发布时间:2024-05-13 

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PEG促进细胞融合的注意事项有那些?

(1)事先做好两种原生质体融合的识别标记,如色素、缺陷型、抗性标记等。
(2)原生质体或细胞密度应在105个/ml,两种原生质体或细胞按1:1等量混合
(3)PEG诱导融合的效果,同分子量大小及浓度高低密切相关。分子量和浓度愈大,促进细胞融合的能力愈高,而其粘度及对细胞的毒性也随之增大,故通常以选用分子4000-6000浓度30-50%的PEG进行融合为宜。
(4)PEG使细胞融合或致死剂量界限很狭小,为达到成功有效的融合,还必须严格掌握PEG的处理时间。一般加入PEG后,24℃培育10-20min(注意时间宜短不宜长,过长使原生质体周围包裹一层膜形成凝集体,降低融合率),缓缓加入高钙离子溶液15min后用冲洗液清洗,离心收集细胞或原生质体。

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peg8000溶液直接水溶解
溶解性口诀
钾钠铵盐溶水快 ,①
硫酸盐除钡铅钙.②
氯化物溶氯化银,
硝酸盐溶液都透明.③
口诀未皆沉.④
溶解性口诀二
钾、钠、铵盐、硝酸盐;
氯化物除银、亚汞;
硫酸盐除钡铅;
碳酸、磷酸盐,溶钾、钠、铵.
溶解性口诀三
钾钠铵硝皆溶、盐酸盐溶银亚汞;
硫酸盐溶钡铅、碳磷酸盐溶.
数酸溶碱少溶、钾钠铵钡溶
溶解性口诀四
钾、钠、硝酸溶,(钾盐、钠盐硝酸盐都溶于水.)
盐酸除银(亚)汞,(盐酸盐除氯化银氯化亚汞外都溶.)
再说硫酸盐,容钡、铅,(硫酸盐溶硫酸钡硫酸铅.)
其余几类盐,(碳酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、硅酸盐硫化物)
溶钾、钠、铵,(相应钾盐、钠盐铵盐溶)
说碱类,钾、钠、铵钡.(氢氧化钾、氢氧化钠、氢氧化钡氨水溶)
另几种微溶物,单独记住.
溶解性口诀五
钾钠铵盐硝酸盐
完全溶解困难
氯化亚汞氯化银
硫酸钡硫酸铅
沉淀记间
氢硫酸盐碱类
碳酸磷酸硝酸盐
溶钾钠铵

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